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限制酶在人类基因组DNA可有许多的酶切识别点

来源： 中国亲子鉴定基因检测中心 日期：2012-07-04 点击： 0 属于： 鉴定新闻

昆山DNA鉴定中心模板DNA起始拷贝数不同，CT值即不同：起始拷贝数越高，CT值就越低。Ci值与标准摸板数量的对数值之间有严格的线性关系，利用系列标准棋板的CT值，制成标准曲线，根据待测样品的Cr值，即可通过标准|llI线确定待测样品起始的DNA数量。荧光实时定嫩PCR技术具有极高的灵敏度，可以测定极微堪的DNA，同时也具有极高人类特异性。

限制性核酸内切酶消化

限制性核i睃内切酶(rcstriction endonuclezse)，简称限制酶，是来源于细菌体内的一类酶，能够识别双链DNA巾的特殊回文式序列(palindrome sequence)，并能在识别序列内将DNA双链切断。限制酶活性要求稳定，酶的识别J芋列位于VN'rR序列的两翼，尽可能地靠近VNTR序列的5’端和3‘端。例如EcoR I的识

别序列为：

5'_GAATTC_3'

3’_CTTAA(r5’

经过EcoRI水解盾，在识别序列内非对称切断DNA双链-两断端为：

5‘-G AATTC-3'

3，-CTTAA +G-5-

两断端分别有突出的数个碱基，称为黏性末端。还有一种限制酶水解DNA后的断端没有伸出的单链碱基，称为平端。例如HaeⅢ切断DNA的序列与方式：

5'_GGCC_3r5'-GG -3 7

。，一CCG G-5/一。，．翟+墨；，

昆山DNA鉴定中心目前发现的限制酶有近500种，每一种限制酶_椰有特定的识别序列（表41）．因为人类基因组DNA极其庞大，一种限制酶在人类基因组DNA可有许多的酶切识别点，消化过程中所有的识别点同时被切断，能与探针杂交的内切酶酶解的DNA分子都是特异性片段。

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